Bitė darbininkė – lytiškai nesubrendusios patelės, negali poruotis. gyvena apie 4 savaites. Šeimoje atlieka pagrindinius avilio ir lauko darbus.
Išsivysto per 21 parą. kūno ilgis 12–14 mm, masė 90–100 mg, turi išlavintas vaško liaukas, geluonį, trečiosios poros kojų blauzdose gurbelius (krepšelius) žiedadulkėms rinkti ir nešti. Yra du skirtingi bičių tipai: pavasarinės bitės darbininkės gyvena 28–32 dienas, rudeninės – per žiemą (6–7 mėnesius).
Bitės darbininkės renka nektarą ir žiedadulkes, perdirba nektarą į medų, žiedadulkes į bičių duoną, siuva korius, maitina motiną ir tranus, prižiūri perus, valo lizdą, kontroliuoja prieauglio kiekį.